江西空气微生物分析方法验证诚信企业「世纪久海」

{微生物检测}微生物分离纯化

4、富集培养法

富集培养法的方法和原理非常简单。小解剖刀常用的接种方法有以下几种：1、划线接种这是zui常用的接种方法。我们可以创造一些条件只让所需的微生物生长，在这些条件下，所需要的微生物能有效地与其他微生物进行竞争，在生长能力方面远远超过其他微生物。如果要分离一些专性寄生菌，就必须把样品接种到相应敏感宿主细胞群体中，使其大量生长。通过多次重复移种便可以得到纯的寄生菌。

5、厌氧法

在实验室中，为了分离某些yanyangjun，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml(其中10g或者10ml用于阳性对照试验)。然后快速冷却，并进行接种。接种后，加入无菌的石蜡于培养基表面，使培养基与空气隔绝。另一种方法是，在接种后，利用n2或co2取代培养基中的气体，然后在火焰上把试管口密封。有时为了更有效地分离某些yanyangjun，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。

6、单细胞(或单孢子)分离法

是采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养。2、液体石蜡法指将junzhong接种在适宜的斜面培养基上，***适条件下培养好后注入灭的液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置于低温(4～6℃)干燥处进行保存的一种保藏方法。较大的微生物，可采用毛细管提取单个个体。个体相对较小的微生物，需采用显微操作仪，在显微镜下用毛细管或显微zhen、钩、环等挑取单个微生物细胞或孢子以获得纯培养。单细胞分离法对操作技术有比较高的要求。

抑菌效力

试验所用的菌株传代次数不得超过 5 代（从jun种保藏中心获得的冷冻干燥jun种为第 0 代），并采用适宜的jun种保藏技术进行保存，以保证试验菌株的生物学特性。培养基适用性检查的jun种及新鲜菌体培养见表 1。

表 1培养基适用性检查、方法适用性试验、抑菌效力测定用的试验菌培养条件

试验菌株                   试验培养基                         培养温度             培养时间

1、金黄色putao球菌

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大豆胨液体培养基

30～35℃

18～24小时

2、铜绿假单胞菌）

3、大肠埃希菌

胰酪大豆胨琼脂培养基或胰酪大

豆胨液体培养基

4、白色nian珠菌

沙氏葡萄糖琼脂培养基或沙氏葡

萄糖液体培养基

20～25℃

24-48小时

5、黑曲霉

20～25℃5～7天或直到获得丰富的孢子

商业无菌注意事项

1.要求有厌氧培养的一定要在厌氧环境下培养。

2.取样测pH值，要与同批正常样相比，看是否有显著差异。

3.对pH 值有的样品都要做涂片染色镜检，与同批正常样相比，看是否有明显的微生物增殖现象。

4.保温期间出现的胀包，漏包、或开包发现PH、感官异常、变质，进一步镜检发现有异常数量细菌的样品均应进行划线培养。