河北人手微生物限度检查方法信息推荐「世纪久海」

{微生物检测}标准

——微生物检测标准——

GB 4789.40-2010食品安全标准 食品微生物学检验 阪崎肠gan菌检验

GB 4789.13-2012食品安全标准 食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验

GB 4789.38-2012食品安全标准 食品微生物学检验 大肠埃希氏菌计数

GB 4789.3-2010食品安全标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数

GB 4789.30-2010食品安全标准 食品微生物学检验 单核细胞李斯特氏菌检验

GB 4789.39-2013食品安全标准 食品微生物学检验 粪大肠菌群计数

GB 4789.7-2013食品安全标准 食品微生物学检验 副溶血性弧菌检验

GB 4789.10-2010食品安全标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄qiu菌检验

GB 4789.2-2010食品安全标准 食品微生物学检验 菌落总数测定

抑菌效力-培养基

培养基的制备

1.胰酪大豆胨液体培养基

 胰酪胨17.0克

氯化钠5.0克

大豆木瓜蛋白酶消化物3.0克

磷酸氢二钾2.5克

葡萄糖（一水合）2.5克

水1000mL

除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2，加入葡萄糖，分装，灭菌。

胰酪大豆胨液体培养基置 20～25℃培养。

2. 胰酪大豆胨琼脂培养基

胰酪胨15.0克

大豆木瓜蛋白酶水解物5.0克

琼脂15.0克

水1000ml

除琼脂外，取上述成分，混合。微温溶解，调节 pH 值使灭菌后在 25℃的 pH 值为 7.3±0.2，加入琼脂，加热溶化后，摇匀，分装，灭菌。

3.沙氏葡萄糖液体培养基

沙氏葡萄糖琼脂培养基照微生物限度检查法（附录ⅩⅢ C）制备。

微生物限度检测方法主要包括3种。      

1.微生物计数法：该种检测方法用于能在有氧条件下生长的嗜温细菌和真菌的计数。本法用于检查非无菌制剂及其原、辅料等是否符合相应的微生物限度标准。检验项目分别为：需氧菌、霉菌及酵母菌计数。其中，需氧菌计数方法适用性试验：铜绿假单胞菌、金黄色、枯草芽孢。供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物***性。霉菌及酵母菌计数方法适用性试验：白色、黑曲霉。      

2.控制菌检查法：控制菌检查法系用于在规定的试验条件下，检査供试品中是否存在特定的微生物。分别为培养基适用性检查和控菌检查方法适用性试验。控制菌计数方法适用性试验：耐胆盐革兰阴性菌、大肠埃希氏菌、沙门氏菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄菌、梭菌、白色。在厌氧微生物的培养过程中，zui重要的一点就是要除去培养基中的氧气。      

3.方法学适用性试验：药品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。  

配制培养基注意事项

1.灭菌时严格按照规定加热、加压，切忌时间过长压力过高，否则会造成营养成分的破坏。

2.切忌使用铜锅、铁锅配制培养基。

3.培养基不能二次高压灭菌。

4.划线用培养基可放入冰箱或培养箱除去水分。  

无菌操作注意事项

1.进入无菌室之前***行空气消毒，工作人员进入无菌室以前，必须于缓冲间更换消毒过的工作服、工作帽及工作鞋。

2.动作要轻，尽量减少走动，以免搅动空气。

3.操作要靠近酒精灯火焰区，使用吸管要用吸球。

4.接种环/接种针用前用后进行火焰灭菌。

5.工作结束作好终末消毒，所有培养物均应高压灭菌后再扔掉，以免污染环境。