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发布时间:2022-01-01 05:23:00 作者:世纪久海





{微生物检测}

——食品微生物项目背景 ——
食源病原微生物引起的食源性疾病是食品安全的***问题。食源病原微生物可通过接触物表面、水、土壤、空气、排泄物、食物等媒介传播,从而污染“从农田到餐桌”的食物链任何环节。厌氧的方法可用物理、化学、生物等办法使培养容器内的氧气部分或全部消除。由于其种类繁多、来源广泛、危害巨大,并具有群爆发、宿主范围广、传播速度快和社会影响强烈、控制难度大等特点,是引发食品安全危害的重要因素,严重时会危及人类健康甚至社会安定,造成巨大经济损失。食品安全防控历史证明,随着社会发展,法律法规不断完善,在解决或基本解决食品添加剂的添加之后,食源病原微生物引发的食品安全问题就更加突出。
抑菌效力-菌液制备
抑菌效力-菌液制备
取大肠埃希菌、金黄色putao球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物用 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌氯化钠溶液制成 适宜浓度的菌悬液。一般应随机抽取不少于检验用量(两个以上***xiao包装单位)的3倍量供试品。取表 2 黑曲霉的新鲜培养物加入 3~5ml 含 0.05%(ml/ml)聚山梨酯80 的 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌氯化钠溶液,将孢子洗脱。然后,采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内,用含 0.05%(ml/ml)聚山梨酯80 的 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的孢子悬液。
菌液制备后若在室温下放置,应在 2 小时内使用;若保存在 2~8℃,可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2~8℃,在验证过的贮存期内使用。
微生物限度检查
计数方法适用性试验
1.供试液制备
根据供试品的理化特性与生物学特性,采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时,应均匀加热,且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基,不得超过1 小时。
常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用,应建立其他适宜的方法。
(1)水溶性供试品 取供试品,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,或pH7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1:10供试液。若需要,调节供试液pH值至6~8。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医yao工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行***进行洁净度验证。必要时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。
(2)水不溶性非油脂类供试品 取供试品,用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液,或pH7.2磷酸盐缓冲液,或胰酪大豆胨液体培养基制备成1:10供试液。分散力较差的供试品,可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80,使供试品分散均匀。供试品检查时,如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂,应证明其有效性及对微生物***性。若需要,调节供试液pH值至6~8。必要时,用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。
(3)油脂类供试品 取供试品,加入无菌十四烷酸异丙酯使溶解,或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无抑菌性的无菌表面活性剂充分混匀。——{微生物检测}常规鉴定技术二——(二)生理生化试验微生物生化反应:指用化学反应来测定微生物的代谢产物,生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区别的微生物。表面活性剂的温度一般不超过40℃(特殊情况下,zui多不超过45℃),小心混合,若需要可在水浴中进行,然后加入预热的稀释液使成1:10供试液,保温,混合,并在zui短时间内形成乳状液。必要时,用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。
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