食品微生物检测询问报价「世纪久海」

微生物限度检查

计数方法

   计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和可能数法（Most-Probable-Number Method，简称MPN法）。MPN 法用于微生物计数时jing确度较差，但对于某些微生物污染量很小的供试品，MPN法可能是更适合的方法。

   供试品检查时，应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，检测的样品量应能保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。

   计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验

   供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。

   供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。

   若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。

计数方法适用性试验

   1.供试液制备

   根据供试品的理化特性与生物学特性，采取适宜的方法制备供试液。供试液制备若需加温时，应均匀加热，且温度不应超过45℃。供试液从制备至加入检验用培养基，不得超过1 小时。

   常用的供试液制备方法如下。如果下列供试液制备方法经确认均不适用，应建立其他适宜的方法。

   （1）水溶性供试品 取供试品，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，或pH7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基溶解或稀释制成1：10供试液。个体相对较小的微生物，需采用显微操作仪，在显微镜下用毛细管或显微zhen、钩、环等挑取单个微生物细胞或孢子以获得纯培养。若需要，调节供试液pH值至6～8。必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。水溶性液体制剂也可用混合的供试品原液作为供试液。

   （2）水不溶性非油脂类供试品 取供试品，用pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液，或pH7.2磷酸盐缓冲液，或胰酪大豆胨液体培养基制备成1：10供试液。食品微生物限度概述微生物限度检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行。分散力较差的供试品，可在稀释液中加入表面活性剂如0.1%的聚山梨酯80，使供试品分散均匀。若需要，调节供试液pH值至6～8。必要时，用同一稀释液将供试液进一步10倍系列稀释。

   （3）油脂类供试品 取供试品，加入无菌十四烷酸异丙酯使溶解，或与zui少量并能使供试品乳化的无菌聚山梨酯80或其他无抑菌性的无菌表面活性剂充分混匀。13-2012食品安全标准食品微生物学检验产气荚膜梭菌检验GB4789。表面活性剂的温度一般不超过40℃（特殊情况下，zui多不超过45℃），小心混合，若需要可在水浴中进行，然后加入预热的稀释液使成1：10供试液，保温，混合，并在zui短时间内形成乳状液。必要时，用稀释液或含上述表面活性剂的稀释液进一步10倍系列稀释。

2.薄膜过滤法

   除另有规定外，按计数方法适用性试验确认的方法进行供试液制备。取相当于1g、1ml或10c㎡供试品的供试液，若供试品所含的菌数较多时，可取适宜稀释级的供试液，照方法适用性试验确认的方法加至适量稀释液中，立即过滤，冲洗，冲洗后取出滤膜，菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基或沙氏葡萄糖琼脂培养基上培养。⑤穿刺法:用接种针沾取的微生物经穿刺而进入半固体深层培养基中。

   培养和计数 培养条件和计数方法同平皿法，每张滤膜上的菌落数应不超100cfu。

   菌数报告规则 以相当于1g、1ml或10c㎡供试品的菌落数报告菌数；若滤膜上无菌落生长，以<1报告菌数（每张滤膜过滤1g、1ml或10c㎡供试品），或<1乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。