广东工作台微生物限度检查方法诚信企业「世纪久海」

抑菌效力

铜绿假单胞菌菌悬液：接种铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至  

用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。

8.2.2金黄色pt球菌菌悬液：接种金黄色pt球菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基，30～35℃培养18～24小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至             ，用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。

微生物限度检查

   （2）薄膜过滤法 薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45μm，直径一般为50mm，若采用其他直径的滤膜，冲洗量应进行相应的调整。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。培养1、根据培养时是否需要氧气，可分为好氧培养和厌氧培养两大类。水溶性供试液过滤前先将少量的冲洗液过滤以润湿滤膜。油类供试品，其滤膜和滤器在使用前应充分干燥。为发挥滤膜的da过滤效率，应注意保持供试品溶液及冲洗液覆盖整个滤膜表面。供试液经薄膜过滤后，若需要用冲洗液冲洗滤膜，每张滤膜每次冲洗量一般为100ml。总冲洗量不得超过1000ml，以避免滤膜上的微生物受损伤。

   取照上述“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液适量（一般取相当于1g、1ml或10c㎡的供试品，若供试品中所含的菌数较多时，供试液可酌情减量），加至适量的稀释液中，混匀，过滤。用适量的冲洗液冲洗滤膜。

   若测定需氧菌总数，转移滤膜菌面朝上贴于胰酪大豆胨琼脂培养基平板上；若测定霉菌和酵母总数，转移滤膜菌面朝上贴于沙氏葡萄糖琼脂培养基平板上。按表1规定条件培养、计数。保藏方法：1、定期移植法亦称传代培养保藏法，指将junzhong接种于适宜的斜面培养基上，***适条件下培养，完成培养于4～6℃进行保存并间隔一定时间(3-6个月)进行移植培养的一种短期种保藏方法。每株试验菌每种培养基至少制备一张滤膜。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。

结束判断

（1）供试品检出控制菌或其它致病菌时，按一次检出结果为准，不再复试。

（2）供试品的细菌数、霉菌和酵母菌数其中任何一项不符合该品种项下的规定，应从同一批样品中随机抽样，独立复试两次，以 3 次结果的平均值报告菌数。

（3）供试品的细菌数、霉菌和酵母数及控制菌三项检验结果均符合该品种项下的规定，判供试品符合规定；若其中任何一项不符合该品种项下的规定，判供试品不符合规定。

大肠菌群注意事项

1.对乳糖胆盐管产气的观察只要有气泡往上冒就算产气。

2.在伊红美兰琼脂平板上挑取菌落时一定要选典型菌落。

霉菌、酵母菌检验注意事项

1.稀释样品时用无菌水。

2.3天观察时把所有的酵母菌做标记。

3.如果有霉菌被培养出，请不要把皿盖随便打开，待培养物高压灭菌后再清洗。

坏包分析注意事项

1.对已开包的酸包胀包要马上转移到无菌瓶中，已防二次污染。

2.根据坏包的不同表现状态适当的选择培养项目。

3.做微生物培养的同时测定感官、理化指标，注意其有何变化。