人手微生物分析方法验证服务介绍 武汉世纪久海

抑菌效力-菌液制备

抑菌效力-菌液制备

取大肠埃希菌、金黄色putao球菌、铜绿假单胞菌的新鲜培养物用 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌氯化钠溶液制成 适宜浓度的菌悬液。取表 2 黑曲霉的新鲜培养物加入 3～5ml 含 0.05％（ml/ml）聚山梨酯80 的 pH7.0 无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液或 0.9%无菌氯化钠溶液，将孢子洗脱。除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃~35℃。然后，采用适宜方法吸出孢子悬液至无菌试管内，用含 0.05％（ml/ml）聚山梨酯80 的 0.9%无菌氯化钠溶液制成适宜浓度的孢子悬液。

菌液制备后若在室温下放置，应在 2 小时内使用；若保存在 2～8℃，可在24 小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在 2～8℃，在验证过的贮存期内使用。

微生物限度检查

计数方法

   计数方法包括平皿法、薄膜过滤法和可能数法（Most-Probable-Number Method，简称MPN法）。MPN 法用于微生物计数时jing确度较差，但对于某些微生物污染量很小的供试品，MPN法可能是更适合的方法。

   供试品检查时，应根据供试品理化特性和微生物限度标准等因素选择计数方法，检测的样品量应能保证所获得的试验结果能够判断供试品是否符合规定。所选方法的适用性须经确认。

   计数培养基适用性检查和供试品计数方法适用性试验

   供试品微生物计数中所使用的培养基应进行适用性检查。

   供试品的微生物计数方法应进行方法适用性试验，以确认所采用的方法适合于该产品的微生物计数。

   若检验程序或产品发生变化可能影响检验结果时，计数方法应重新进行适用性试验。

1.平皿法

   平皿法包括倾注法和涂布法。除另有规定外，取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和菌数测定，每稀释级每种培养基至少制备2个平板。

   培养和计数 除另有规定外，胰酪大豆胨琼脂培养基平板在30～35℃培养3～5天，沙氏葡萄糖琼脂培养基平板在20～25℃培养5～7天，观察菌落生长情况，点计平板上生长的所有菌落数，计数并报告。菌落蔓延生长成片的平板不宜计数。有时为了更有效地分离某些yanyangjun，可以把所分离的样品接种于培养基上，然后再把培养皿放在完全密封的厌氧培养装置中。点计菌落数后，计算各稀释级供试液的平均菌落数，按菌数报告规则报告菌数。若同稀释级两个平板的菌落数平均值不小于15，则两个平板的菌落数不能相差1倍或以上。

   菌数报告规则 需氧菌总数测定宜选取平均菌落数小于300cfu的稀释级、霉菌和酵母菌总数测定宜选取平均菌落数小于100cfu的稀释级，作为菌数报告的依据。(1)接种灭菌(2)开启棉塞(3)管口灭菌(4)挑起菌苔(5)接种(6)塞好棉塞。取zui高的平均菌落数，计算1g、1ml或10c㎡供试品中所含的微生物数，取两位有效数字报告。

   如各稀释级的平板均无菌落生长，或仅zui低稀释级的平板有菌落生长，但平均菌落数小于1 时，以<1 乘以zui低稀释倍数的值报告菌数。

药品微生物限度检查适用剂型：

1.部分口服给药制剂 : 、酊剂、中药丸剂、糖浆剂、散剂等。

2.含中药原粉、豆豉、、动物组织等口服制剂。

3.鼻用制剂等。

4.洗剂等。

5.灌肠剂等。

药品微生物限度检查意义：

1.确定是否污染或其污染程度，控制药品的质量；

2.保证用药的有效性和安全性；

3.可作为衡量药品生产全过程卫生水平的根据之一。