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{微生物}培养

——微生物培养——

指将微生物接种到培养基内，经一定条件使微生物生长繁殖。接种的方法有 6种。①涂布法:将纯菌或含菌材料均匀地涂布在固体培养基表面。②划线法:用接种环沾取含菌材料，在固体培养基表面划线。厌氧的方法可用物理、化学、生物等办法使培养容器内的氧气部分或全部消除。③倾注法:取少许含菌材料放入无菌培养皿中，然后倾入已融化并已冷却至48℃左右的琼脂灭菌培养基，摇匀后冷却凝固。④点植法:用接种针在固体培养基表面接触几点。⑤穿刺法:用接种针沾取的微生物经穿刺而进入半固体深层培养基中。⑥浸洗法:用接种针挑取含菌材料，在液体培养基中洗下。培养方法则根据微生物对氧的要求情况分为需氧和厌氧两种。需氧培养是指必须在有氧环境中进行培养，必要时用振荡或通气搅拌达到充分供氧;厌氧培养是培养过程一直保持在少氧或无氧的环境中。厌氧的方法可用物理、化学、生物等办法使培养容器内的氧气部分或全部消除。通常用抽真空方法，有时将两种方法结合使用，使厌氧培养更为理想。接种、培养是食品微生物应用、研究过程中基本和***的方法。

{食品微生物限度}

食品微生物限度概述

     微生物限度检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。如海产品以副溶血性弧菌作为参考菌群，蛋与蛋制品以沙门氏菌菌、金黄色葡萄qiu菌、变形gan菌等作为参考菌群，米、面类食品以蜡样芽孢gan菌、变形gan菌、霉菌等作为参考菌群，罐头食品以耐热性芽孢菌作为参考菌群等。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医yao工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行***进行洁净度验证。

    供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物***性。

除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃~35℃;霉菌、酵母菌培养温度为23℃~28℃。检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以xiao包装单位报告。

抑菌效力

铜绿假单胞菌菌悬液：接种铜绿假单胞菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基中，30～35℃培养18～24小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至  

用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。

8.2.2金黄色pt球菌菌悬液：接种金黄色pt球菌的新鲜培养物至胰酪胨大豆肉汤培养基，30～35℃培养18～24小时；取上述培养物用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至             ，用比浊法制成每1ml含菌数约为108cfu。

药品微生物限度检测的内容：

1.无菌检查。

2.微生物限度检查。

3.微生物总数检查。

4.控制菌检查（大肠埃希菌、大肠菌群、沙门菌、铜绿假单胞菌、金黄色、梭菌、白色等）。

微生物限度检测条件：

1、检查环境和人员要求

（1）环境要求 : 无菌室内进行。背景洁净度10,000 级下的局部 100 级，单向流空气。

（2）操作人员：卫生、着装符合要求。

（3）操作要求：严格遵守无菌操作，严防污染。

2、方法验证

由于某些供试品具有活性，在建立测定方法或原测定法的检验条件发生改变时，可能影响检验结果的准确性，必须对供试品的抑菌活性及测定方法的可靠性进行验证。

3、正确抽样

（1）抽样方法：

u 随机；

u 优先抽有疑问样品；

u 抽样量：检测用量的 3~5 倍；

（2）检测用量

（3）检测量