广东表面微生物限度试验周期*** 世纪久海检测技术公司

微生物限度检查

   3.MPN 法

   取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，所有试验管在30～35℃培养3～5天，如果需要确认是否有微生物生长，按方法适用性试验确定的方法进行。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3査每1g 或1ml供试品中需氧菌总数的可能数。供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物***性。

   结果判断

   需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数（包括真菌菌落数）；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数（包括细菌菌落数）。若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素（如氯霉su、庆大霉su）的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。若采用MPN法，测定结果为需氧菌总数。

使用无菌室注意事项

1.无菌室要保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用品，如：酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、记号铅等。

2.室内检验用具及桌凳应保持固定位置，不随便移动。

3.每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作台、门、窗、桌凳及地面，然后用二氧化氯溶液喷雾消毒空气或过氧熏蒸，紫外灯杀菌。

4.定期检查室内空气无菌状态，进行细菌和霉菌的检查。

5.无菌室杀菌前应将所有物品置于操作之部位，然后打开紫外灯杀菌半小时，时间一到，关闭紫外灯待用。

6.操作应严格按照无菌操作规定进行，操作少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。

供试品中微生物的回收

……涂布法“取15~20ml”修订为“取适量（通常为15~20ml）”。……(2)薄膜过滤法薄膜过滤法所采用的滤膜孔径应不大于0.45jLtm，直径一般为50mm,若采用其他直径的滤膜，冲洗量应进行相应的调整。供试品及其溶剂应不影响滤膜材质对微生物的截留。4、浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。滤器及滤膜使用前应采用适宜的方法灭菌。使用时，应保证滤膜在过滤前后的完整性。

学习：这个“完整性”应该类似生产过程所用的滤膜的完整性，不同的是“保证”的方法是滤器验收、厂家报告单、使用中外观检查等；必要时应该进行适当方式的完整性检测。