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{食品微生物}检测——{大肠gan菌}

——大肠gan菌简介——

    大肠埃希氏菌(Escherichia coli)通常被称为大肠gan菌，是Escherich在1885年发现的，在相当长的一段时间内，一直被当作正常肠道菌群的组成部分，认为是非致病菌。5、厌氧法在实验室中，为了分离某些yanyangjun，可以利用装有原培养基的试管作为培养容器，把这支试管放在沸水0浴中加热数分钟，以便逐出培养基中的溶解氧。直到20世纪中叶，才认识到一些特殊血型的大肠gan菌对人和动物有病原性，尤其对婴儿和幼畜(禽)，常引起严重腹泻和坏血症，它是一种普通的原核生物，根据不同的生物学特性将致病性大肠gan菌分为6类:肠致病性大肠gan菌(EPEC)、肠产毒性大肠gan菌(ETEC)、肠侵袭性大肠gan菌(EIEC)、肠血性大肠gan菌(EHEC)、肠黏附性大肠gan菌(EAEC)和弥散粘附性大肠gan菌(DAEC).。大肠gan菌属于革兰氏阴性细菌(G-)。

{微生物检测}微生物接种

4、浇混接种

该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45℃左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。

5、涂布接种

与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。

6、液体接种

从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。

7、注射接种

该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的yimiao预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。

8、huoti接种

huoti接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的huoti可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。

注：有所接种必须无菌操作

培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具(如接种针和吸管等)在无菌条件下接种含菌材料(如样品、菌苔或菌悬液等)于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。

(1)接种灭菌 (2)开启棉塞 (3)管口灭菌 (4)挑起菌苔 (5)接种 (6)塞好棉塞。

微生物限度检查

   3.MPN 法

   取规定量供试品，按方法适用性试验确认的方法进行供试液制备和供试品接种，所有试验管在30～35℃培养3～5天，如果需要确认是否有微生物生长，按方法适用性试验确定的方法进行。微生物检验中常用的生化反应有：1、糖酵解试验不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。记录每一稀释级微生物生长的管数，从表3査每1g 或1ml供试品中需氧菌总数的可能数。

   结果判断

   需氧菌总数是指胰酪大豆胨琼脂培养基上生长的总菌落数（包括真菌菌落数）；霉菌和酵母菌总数是指沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的总菌落数（包括细菌菌落数）。若因沙氏葡萄糖琼脂培养基上生长的细菌使霉菌和酵母菌的计数结果不符合微生物限度要求，可使用含kang生素（如氯霉su、庆大霉su）的沙氏葡萄糖琼脂培养基或其他选择性培养基（如玫瑰红钠琼脂培养基）进行霉菌和酵母菌总数测定。使用选择性培养基时，应进行培养基适用性检查。若采用MPN法，测定结果为需氧菌总数。要求检查沙门菌的供试品，其检验量应增加20g或20ml(其中10g或者10ml用于阳性对照试验)。

使用无菌室注意事项

1.无菌室要保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用品，如：酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、记号铅等。

2.室内检验用具及桌凳应保持固定位置，不随便移动。

3.每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作台、门、窗、桌凳及地面，然后用二氧化氯溶液喷雾消毒空气或过氧熏蒸，紫外灯杀菌。

4.定期检查室内空气无菌状态，进行细菌和霉菌的检查。

5.无菌室杀菌前应将所有物品置于操作之部位，然后打开紫外灯杀菌半小时，时间一到，关闭紫外灯待用。

6.操作应严格按照无菌操作规定进行，操作少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。