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{食品微生物限度}

食品微生物限度概述

     微生物限度检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医yao工业洁净室(区)悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行***进行洁净度验证。3、真空冷冻干燥法指将保藏的junzhong细胞或孢子悬浮于保护剂中，经预冻后在真空条件下使水分升华，再经真空封存后保存的一种长期保存方法。

    供试品检查时，如果使用了表面活性剂、中和剂或灭活剂，应证明其有效性及对微生物***性。

除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃~35℃;霉菌、酵母菌培养温度为23℃~28℃。检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以xiao包装单位报告。

{微生物检测}微生物接种

将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。

接种和分离工具

1.接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀

常用的接种方法有以下几种：

1、划线接种

这是zui常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。

2、三点接种

在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。

3、穿刺接种

在保藏yanyang junzhong或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的junzhong，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。7、注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的yimiao预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。

穿刺接种的两种方法：垂直法和水平法

微生物限度检查

4.供试品中微生物的回收

    微生物的回收可采用平皿法、薄膜过滤法或MPN法。

   （1）平皿法 平皿法包括倾注法和涂布法。表1中每株试验菌每种培养基至少制备2个平皿，以算术均值作为计数结果。

   倾注法 取照上述“供试液的制备” “接种和稀释”和“抗jun活性的去除或灭活” 制备的供试液1ml，置直径90mm的无菌平皿中，注入15～20ml温度不超过45℃熔化的胰酪大豆胨琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基，混匀，凝固，倒置培养。若使用直径较大的平皿，培养基的用量应相应增加。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。6、液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。

   涂布法 取15～20ml温度不超过45℃的胰酪大豆胨琼脂或沙氏葡萄糖琼脂培养基，注入直径90mm的无菌平皿，凝固，制成平板，采用适宜的方法使培养基表面干燥。若使用直径较大的平皿，培养基用量也应相应增加。每一平板表面接种上述照“供试液的制备” “接种和稀释” 和“抗jun活性的去除或灭活”制备的供试液不少于0.1ml。按表1规定条件培养、计数。同法测定供试品对照组及菌液对照组菌数。计算各试验组的平均菌落数。一般应随机抽取不少于检验用量(两个以上***xiao包装单位)的3倍量供试品。

使用无菌室注意事项

1.无菌室要保持清洁整齐，室内仅存放必须的检验用品，如：酒精灯、酒精棉、火柴、镊子、接种针、接种环、记号铅等。

2.室内检验用具及桌凳应保持固定位置，不随便移动。

3.每2周用2%消毒液（二氧化氯等）水溶液擦拭工作台、门、窗、桌凳及地面，然后用二氧化氯溶液喷雾消毒空气或过氧熏蒸，紫外灯杀菌。

4.定期检查室内空气无菌状态，进行细菌和霉菌的检查。

5.无菌室杀菌前应将所有物品置于操作之部位，然后打开紫外灯杀菌半小时，时间一到，关闭紫外灯待用。

6.操作应严格按照无菌操作规定进行，操作少说话，不喧哗，以保持环境的无菌状态。